4/12 Phạm Văn Chiêu, Phường 13,
Quận Gò Vấp, Tp. Hồ Chí Minh, Việt Nam
Tel: 0166 226 2988----- Email: phanloankhtn@gmail.com
Nuôi cấy mô tế bào thực vật
là thuật ngữ được dùng một cách rộng rãi để nói về việc mô tả các phương thức
nuôi cấy các bộ phận thực vật ( Tb đơn, mô, cơ quan) trong ống nghiệm có chứa
môi trường xác định ở đk vô trùng.
Mục
đích chung của nuôi cấy mô tế bào thực vật là sử dụng các điều
kiện như: Nhiệt độ, ánh sáng, thành phần dinh dưỡng, các chất điều hòa sinh trưởng
thực vật… để điều khiển quá trình sinh trưởng và phát triển của tế bào, mô nuôi
cấy theo mục tiêu và yêu cầu đặt ra.
-
Ưu
điểm của phương pháp nuôi cấy mô TBTV:
+ Nhân nhanh với hệ số nhân giống
cao
+ Sản phẩm cây giống đồng nhất
+
Tiết kiệm không gian
+ Nâng cao chất lượng cây giống
+ Khả năng tiếp thị sản phẩm tốt
hơn và nhanh hơn
+ Lợi thế về vận chuyển
+ Sản xuất quanh năm
Xây
dựng một phòng nuôi cấy mô TBTV cần những trang thiết bị như sau:
I.
PHÒNG RỬA, SẤY, HẤP DỤNG CỤ VÀ SẢN XUẤT NƯỚC
CẤT
Phòng rửa dụng cụ phải có bồn rửa lớn,
có đường thoát nước riêng cho axit, có kệ để các thiết bị, có nguồn cung cấp
ga, nước, điện và có thể không khí nén, ống chân không.
Các thiết bị dụng cụ chủ yếu
Máy cất nước 1 lần
Máy cất nước 2 lần
Nồi hấp khử trùng
Tủ sấy 60 – 600oC(loại
có dung tích lớn)
Đồng hồ bấm giờ
Giá ống nghiệm
Xà phòng, axit HCl hoặc sulfuric.
Máy rửa pipet, các loại chổi cọ rửa.
Bồn rửa dụng cụ
II.
PHÒNG CHUẨN BỊ VÀ PHA MÔI TRƯỜNG
Các thiết bị, dụng cụ chủ yếu:
1. Tủ chứa hoá chất
2. Cân phân tích (chính xác
đến 0,0001 g)
3. Cân kỹ thuật (chính
xác đến 0,01 g)
4. Máy đo pH
5. Máy
khuấy từ gia nhiệt
6. Tủ lạnh 100-200L
7. Tủ lạnh sâu (-20 đến -80oC)
8. Lò vi sóng hay bếp đun để
đun nóng môi trường khi trộn với aga
9. Nếu làm trên quy mô lớn thì
cần trang bị thêm: Máy rót môi trường và Máy trộn khi pha lượng lớn môi
trường.
Ngoài ra trong phòng còn có:
- Các dụng cụ thuỷ tinh
trong suốt
- Bông không thấm
nước
- Các dung dịch
chuẩn (stock, solutions)
- Màng lọc Millipore và
giá đơn chịu nhiệt hoặc các phễu lọc thuỷ tinh.
- Các hoá chất diệt khuẩn để xử lý mô thực vật:
Calcium hypochlorite, Sodium hypochlorite, nước bromine, H2O2,
HgCl2, kháng sinh gồm Rifampicin, các polymicin và vancomycin
rong phòng phải có khu vô trùng để chứa môi trường dinh
dưỡng, nước khử trùng..
III.
PHÒNG CẤY VÔ TRÙNG
Phòng cấy vô trùng nên là một phòng nhỏ rộng từ 10-15m2,
có hai lớp cửa để tránh không khí chuyển động từ bên ngoài trực tiếp đưa bụi
vào, kín, sàn và tường cần được lát gạch men hoặc sơn để lau chùi và khử trùng
thường xuyên. Cửa phòng cấy nên là cửa kính vì trong khi thao tác cấy rất dễ bị
phụt đèn cồn do đó cần phải dễ liên lạc với bên ngoài trong lúc cần thiết. Trên
tường gắn đèn UV để khử trùng phòng.
Các thiết bị, dụng cụ
chủ yếu:
1. Tủ cấy vô trùng (laminar,
clean Bench): tủ cấy tĩnh và tủ cấy thổi khí vô trùng. Trong tủ cấy phải có đèn
trắng để dễ làm việc và có đèn UV để khử trùng trước khi làm việc
2. Quạt thông gió
3. Đèn tử ngoại treo tường 1,2m
hoặc treo trần
4. Thiết bị lọc khí.
5. Giá và bàn để môi trường
6. Bộ dụng cụ kẹp cấy, dao mổ,
que cấy vòng, kim mũi nhọn, giấy lọc, bình đựng nước cất, đèn cồn (hoặc đèn
gas), cốc đựng cồn 900
7. Hoá chất xử lý buồng cấy
trước khi cấy: fomadehyde (formalin)40%, NH3 25%
8. Áo choàng, mũ vải, khẩu
trang
IV. PHÒNG
NUÔI
Tất cả các mẫu cấy đều được nuôi trong điều kiện nhiệt độ ánh
sáng, độ ẩm, độ dài chiếu sáng, độ thông khí thích hợp. Phòng nuôi có nhiệt độ
15-30oC tùy theo mẫu cấy và mục đích của thí nghiệm. Nhiệt độ phải
được phân bố đều trong toàn phòng nuôi, phải có đầy đủ ánh sáng huỳnh quang và
có thể điều khiển được cường độ và thời gian chiếu sáng. Phòng nuôi phải được
thổi khí đồng nhất và biên độ độ ẩm được điều chỉnh từ 20-98%.
- Các
giàn đèn huỳnh quang nhiều ngăn, độ chiếu sáng ở chỗ để bình nuôi cấy từ
2000-3000 lux.
- Máy
điều hòa nhiệt độ
- Máy
lắc nằm ngang 100-200 vòng/phút
- Các
thiết bị và dụng cụ nuôi cấy tế bào đơn
- Tủ
ấm.
Phòng nuôi sáng: tường
nên sơn màu trắng. Các giá đèn được lắp đèn ống để chiếu sáng. Trong phòng cần
gắn các máy móc kiểm tra chính xác nhiệt độ, độ ẩm.
Phòng nuôi
tối: để nuôi mô và các xử lí đặc biệt. Phòng cần tất cả các
điều kiện như phòng sáng chỉ khác là không cần lắp đèn chiếu sáng cho cây, cửa
sổ cần được che kín bằng vải đen.
IV.
PHÒNG SINH HÓA
Dùng để tiến hành các phân
tích chuyên sâu về sinh hóa, sinh học phân tử để thu nhận số liệu phục vụ công
tác nghiên cứu và sản xuất. Tùy thuộc vào kinh phí đầu tư và mục đích thí
nghiệm mà có thể trang bị thêm các thiết bị hiện đại như: kính hiển vi có kết
nối máy ảnh kỹ thuật số, camera; tủ hút, tủ ấm; cân các loại; máy cắt tiêu bản;
máy đo pH; máy ly tâm lạnh; máy PCR, máy realtime PCR; máy chạy sắc ký; máy đo
quang phổ; tủ lạnh, tủ lạnh âm sâu;…
THÔNG TIN CHI
TIẾT VUI LÒNG LIÊN HỆ VỚI CHÚNG TÔI
CÔNG TY TNHH
THƯƠNG MẠI KHOA HỌC KỸ THUẬT LÂM VIỆT
VPGD: K63 Khu
Nhà Ở Thới An, Khu Phố 1, Phường Thới An, Quận 12, Tp.HCM
ĐT: 0166
226 2988 ------ EMAIL: phanloankhtn@gmail.com ( Ms LOAN)
Không có nhận xét nào:
Đăng nhận xét